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Bradford 蛋白濃度測定試劑盒
  • 產品貨號:
    BN27183
  • 中文名稱:
    Bradford 蛋白濃度測定試劑盒
  • 英文名稱:
    Bradford Protein Assay Kit
  • 品牌:
    Biorigin
  • 貨號

    產品規(guī)格

    售價

    備注

  • BN27183-1000T

    1000T

    ¥510.00

產品描述

產品信息:

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本試劑盒有效期為一年

產品簡介: 

Bradford 蛋白濃度測定法是目前常用的靈敏度較高的蛋白濃度測定方法之一,其實驗原理是根據考馬斯亮藍(Coommassie Brilliant Blue)G-250與蛋白質的堿性和芳香族氨基酸特別是精氨酸(Arginine) 在酸性介質中結合后,溶液轉變?yōu)樗{色,使染料的最大吸收峰從 465nm 遷移到 595nm,且測定的吸光 值與蛋白濃度成正相關關系;即可通過測定蛋白在 595nm 處的吸光度,推算蛋白濃度,進而進行定量測定。 

本法通過吸光值,推算蛋白濃度,實現了蛋白濃度測定的快速性和簡便性。靈敏度高,比 Lowry 法大約高四倍,測定速度快、簡單,僅需一種試劑即可,且不受大多數樣品中化學試劑的影響。

注意事項: 

1. Bradford 染色液使用前,需將其恢復至室溫,有利于提高檢測的靈敏度;并在使用前充分混勻

2. 標準曲線也有輕微的非線性,因而不能用 Beer 定律進行計算,而只能用標準曲線來測定未知蛋白質的濃度;為了得到更精確的結果,每個蛋白梯度和樣品均需做復孔,每次試驗都必須建立標準曲線 

3. Bradford 法測定蛋白濃度對大多數化學物質的兼容性比較好,比如對還原劑 DTT 的兼容性高達 5mM;但會受到略高濃度的去垢劑影響,需確保 SDS 低于 0.01%,Triton X-100 低于 0.05%,Tween  20/ 60/80 低于 0.015%等 

4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作

使用說明: 

一.配制 BSA 標準品體系(線性范圍 100-1500ug/ml): 

可參考下表配制不同濃度的標準品梯度 ,并充分混勻,避免氣泡生成:

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標準品稀釋液原則上應與為蛋白樣品的溶解液一致,但也可用蒸餾水、生理鹽水或 PBS 進行稀釋

二. 蛋白濃度測定: 

(1)分別取 5μl 不同濃度蛋白標準品和待測樣品加入 96 孔板中;若樣品不足,可以用稀釋液進行稀釋,但須記錄樣品稀釋比例 

(2)各孔加入 200μl G250 染色液,充分振蕩混勻,室溫孵育 2-3min 

(3)用酶標儀測定 595nm 處的吸光度

(4)以標準蛋白濃度(ug/ml)為橫坐標,用 OD 值為縱坐標繪制標準曲線,根據測出的待測樣品的 A595 值,即可得出樣品的蛋白質濃度,進而進行定量計算

參考標準曲線:

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